平台下属主要仪器
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流式细胞仪
简要介绍：流式细胞术(Flow Cytometry, 简称FCM)是一种可以快速、准确、客观，并且同时检测单个微粒(通常是细胞)的多项特性的技术。研究对象为生物颗粒，如各种细胞、染色体、微生物、及人工合成微球等研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征，并加以定量。
主要功能：
1. DNA 分析（包括 细胞周期分析；肿瘤检测, 异倍体分析）；凋亡分析；细胞增殖；
2. 细胞表面分子分析（包括干细胞检测和计数，血小板检测；白血病免疫分型；HIV 监控）
3. 细胞内和细胞外蛋白含量分析
4. 细胞功能分析（包括钙动力学分析；细胞膜分析；细胞功能蛋白含量的检测）
5. 细胞内细胞因子检测等
实验设备：
FACSCalibur性能卓越，不仅通过其用户友好的整体设计帮助临床医生快速实现常规免疫表型、DNA、网织红细胞、血小板、绝对计数等临床分析，FACSCalibur更以其完美的双激光分析和独特的分选功能成为遗传、肿瘤、血液、免疫功能等诸多研究不可或缺的重要工具。
1.标准激光器：488nm，气冷氩离子激光。
第二激光器：635nm，红色二极管激光
2.光电倍增管：光谱检测范围300nm – 1100nm， 电压 150v – 990v
3. 最小检测颗粒大小：0.2m (min) 100m (max)
4. 荧光检测灵敏度：〈 100MESF （Molecules of equivalent soluble fluorescein）
5. 检测分辨率：全峰高CV〈2 % （on FL1 and FL2 with 2um beads)
6. 样本获取速度：10,000 个/秒
7. 脉冲处理系统：峰值、脉冲积分(面积)及脉冲宽度，用脉冲宽度和面积可区分双连体细胞(如假二倍体细胞).
收费标准与说明：
DNA分析：校内，50/样；校外，80/样。
细胞表面标记分析：校内，50/样；校外，80/样。
校内可直接转账，校外可以开发票。如需要本实验室处理样本，或者提供有关试剂，需另外收费。
标本要求
检测细胞表面或细胞内抗原，细胞浓度最好在1×106/ml左右，总体积不少于0.5ml。
细胞分析时，如果使用PI等粘稠度较高的染料，或者组织消化后的细胞，需要用350目微孔膜过滤。
联系方式：
联系人：吕庆华
联系电话：0571-87783868
地址：杭州解放路88号浙江大学医学院附属第二医院门诊楼1309室
邮编：310009
流式细胞分选仪
简要介绍：流式细胞术(Flow Cytometry, 简称FCM)是一种可以快速、准确、客观，并且同时检测单个微粒(通常是细胞)的多项特性的技术，同时可以对特定群体加以分选。研究对象为生物颗粒，如各种细胞、染色体、微生物、及人工合成微球等研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征，并加以定量。
主要功能：
1. 无菌细胞分选，包括原代细胞，骨髓细胞，肿瘤细胞系，组织的单细胞悬液
2. 荧光标记（如GFP）转染细胞分选
3. 微孔板/载玻片定量分选
4. 蛋白多重磷酸化定量分析（BD Phosflow, BD Cytometric Bead Array）
5. 多色荧光流式细胞分析
实验设备：
BD FACSAria流式细胞仪是全球第一台台式高速细胞分选仪，使用石英杯流动检测池固定光路校准技术。BD FACSAria流式细胞仪系统软件的分选设定和监测功能大大简化了操作。仪器内置的BD AccuDrop系统可以快速准确地确定液滴延迟时间。液流监测系统自动监测液流断点，检查堵塞，实现了细胞分选的无人操作。
获取速度达70,000细胞/秒，分析速度达50,000细胞/秒
多色分析，分析参数可达15色之多
分选纯度：〉98%
CV值〈2.0%
石英杯流动检测池荧光检测灵敏度度〈125 MESF
激光器配置
Laser1:488nm Coherent Sapphire solid state 13mW-20mW
Laser2:633 nm JDS Uniphase HeNe air-cooled 10mW-20mW
Laser3:375 nm Point Source Violet solid state(for Hoechst and DAPI010MW-17mW .
十一个探测器，包括一个前向探测器，一个侧向角探测器， 探测器五个488nm的荧光探测器，二个633nm的荧光探测器，二 个 375nm的荧光探测器。
进样仓自动加压，自动混匀样本，自动冲洗进样管路
喷嘴选择70mm或100mm，满足绝大多数细胞分选的要求，喷嘴拆换简便、精确
两管或四管分选，可以使用多种规格的收集管
进样管规格：12*75mm管，15ml离心管
配件BD ACDU装置，可以在微孔板或载波片上定量分选细胞
软件自动仪器控制和计算分选设置，液滴监控，自动检查堵塞
样本和分选细胞温控系统
预约流程：
由于上机时间紧张，GFP分选等简单服务仅对所内开放，外单位请勿预约。
外单位如需使用流式细胞分选平台，需签订科研合作协议书，具体请联系管理员。
时间：周一至周五下午2:00-5:00。
地点：杭州解放路88号浙江大学医学院附属第二医院门诊楼1208室
校内用户
（a） 联系管理员，取预约申请表，预付款（800元）转帐单；
（b） 填写样本信息和分选要求，课题负责人签字，转帐单签字盖章；
（c） 至彭佳萍老师处（1211室，0571-87784527）登记，交预付款转帐单；
（d） 按预约时间上机完成分选；
（e） 至彭佳萍老师处结算费用，缴付尾款，按预留邮箱发送报告。
校外用户
（a） 联系管理员，取预约申请表，合作协议书；
（b） 填写样本信息和分选要求，签订合作协议；
（c） 至彭佳萍老师处（1211室，0571-87784527）登记，按协议约定缴预付款；
（d） 按预约时间上机完成分选；
（e） 至彭佳萍老师处结算费用，缴付尾款，按预留邮箱发送报告。
取消预约：最迟于预约时段前一天电话取消预约。
表格下载：
浙江大学肿瘤研究所流式细胞分选预约申请表
收费标准：
校内，800元/小时；校外，1200元/小时。收费由预约时间起，一小时起，后续按实际分钟数计。请谨慎预估时间，在预约上机时间30分钟内将样品准备好，如未能在此时间内出现则视同弃权。
注意事项：
浙江大学肿瘤研究所流式细胞分选注意事项
结果下载和后续处理：
流式细胞分选仪结果由管理员提供下载地址，处理软件使用Flowjo或WinMDI。
联系方式：
联系人：葛维挺
联系电话：0571-87783762 (因办公室搬迁，暂时请邮件联系)
院内短号：669135
E-mail：
地址：杭州解放路88号浙江大学医学院附属第二医院门诊楼1308室
邮编：310009
激光共聚焦显微镜
简要介绍：激光共聚焦显微镜系统可进行固定或活组织和细胞的微分干涉及荧光的断层扫描，多重荧光的断层扫描及重叠，转移(FRET)的分析，光漂白后的荧光修复(FRAP)等。
主要功能：
1. 细胞内形态观察，包括核型观察，线粒体、内质网及细胞骨架等亚细胞结构的观察；也可以对细胞核内的染色体进行计数。
2. 厚组织内光切片，以获得较一般显微镜更高分辨率的组织单层照片。并可连续取得不同层面的图像。
3. 活体或固定标本的3D重建，最小切片厚度小于0.384μm。
4. 固定标本定量定位分析：包括：结构属性(如形状大小)和分子属性(如荧光信号强弱)。
5. 活细胞的离子通道研究，离子变化的实时测定包括：钙、钠、钾、镁离子、细胞膜电位和pH等。
6. 活细胞荧光信号动态变化的时间序列图像采集和分析。(包括快速反应信号高时间分辨率线扫描图像采集和分析。)
7. 荧光漂白后恢复(FRAP)：可以对细胞膜侧向扩散进行测量，也可以进行细胞间通讯的研究。
8. 荧光共振能量转移(FRET)：可用于研究蛋白质以及蛋白复合体的结构和空间构象，免疫分子之间的互相作用等等。
9. 荧光光谱测定：可以利用XYλ来确定未知染料或者自发荧光的激发光和发射波段。
10. 粘附细胞分选：能够对粘附在培养皿底部的细胞根据生化特性分选或者对突变细胞进行分选。
实验设备：
本仪器为Zeiss LSM 710激光共聚焦显微镜
激光器：633,543,458/488/514,405nm
高分辨率物镜：10X,20X,40X,63X(oil)
棱镜分光，光电倍增管检测
多种扫描方式：x/y/z/t/λ
任意形状区域单独设置的激光漂白
活细胞孵育观察系统（37℃温控和CO2装置）
收费标准与说明：
普通观察：校内，300元/小时；校外，500元/小时。
活细胞联系观察：如有需要请面谈，收费标准另议。
校内可直接转账，校外可以开发票。如需要本实验室处理样本，或者提供有关试剂，需另外收费。
样品要求：
1. 除了有特别需要，固定装片请使用有抗萃灭剂封片。
2. 活细胞观察请使用专用的培养皿
结果下载和后续处理：
激光共聚焦显微镜观测结果由管理员提供下载地址，如数据量大则提供光盘刻录，处理软件使用ZEN LE软件（本地下载，原始网站最新版）。
联系方式：
联系人：董琦
联系电话：0571-87784501
地址：杭州解放路88号浙江大学医学院附属第二医院门诊楼1217室
邮编：310009
